BD Pharmingen™ MonoBlock™ Leukocyte Staining Bufferは、フローサイトメトリー解析において、シアニン系およびシアニン様タンデム蛍光色素が白血球サブセット、特に単球およびマクロファージに非特異的に結合するのを阻害するよう設計されています。本製品は、シアニン系およびシアニン様タンデム蛍光色素で標識された抗体を用いた細胞染色において、マウスおよびヒト細胞の両方に使用可能です。
BD Pharmingen™ MonoBlock™ Leukocyte Staining Buffer は、既存のフローサイトメトリー染色プロトコールへ簡便に組み込むことができ、細胞懸濁液または抗体カクテルのいずれかに添加するだけで使用できます。また、 BD Horizon™ Brilliant Stain Buffer, BD Pharmingen™ Mouse Fc Block™ and BD Pharmingen™ Human BD Fc Block™ など、一般的に使用されているバッファーと互換性がありますので、同時使用可能です。
本製品は、PE‑Cy5、PE‑Cy7、APC‑Cy7、APC‑H7、PE‑CF594などの シアニン系およびシアニン様タンデム蛍光色素を用いた細胞染色時に使用することが推奨されます。これらの蛍光色素は、単球やリンパ球において程度の異なるバックグラウンド染色を引き起こすことがあります。BD Pharmingen™ MonoBlock™ Leukocyte Staining Bufferは、蛍光色素と白血球との非特異的相互作用を低減し、標的マーカーの真の発現を明確に検出することを可能にします。
シアニン系タンデム蛍光色素を用いた骨髄系細胞およびリンパ系細胞のフローサイトメトリー解析
BD Pharmingen™ MonoBlock™ Leukocyte Staining Buffer は、抗体特異的染色を維持したまま、ヒト白血球におけるバックグラウンド染色を低減します
溶血処理した全血を、PE‑Cy7標識の細胞表面マーカー（CD279、CD3、CD19）で染色した場合、単球にバックグラウンド染色が認められます。染色プロトコールにBD Pharmingen™ MonoBlock™ Leukocyte Staining Bufferを加えることで、PE‑Cy7に由来する単球の非特異的バックグラウンド染色が低減されます。一方で、リンパ球におけるCD279（PD‑1）、CD3、CD19の抗体特異的染色には影響を与えません。
BD Pharmingen™ MonoBlock™ Leukocyte Staining Bufferの有無によるヒト末梢血白血球のフローサイトメトリー解析
BD Pharmingen™ MonoBlock™ Leukocyte Staining Buffer はマウス白血球におけるバックグラウンド染色を低減します
シアニン系およびシアニン様タンデム蛍光色素によるバックグラウンド染色は、マウス白血球においても観察されます。さらに、一部の細胞はFcγ受容体を発現しており、検出抗体との非特異的結合によってバックグラウンドが生じることがあります。このような問題は通常、BD Pharmingen™ Mouse Fc Block™などのFc受容体ブロッキング試薬を用いることで対処されます。
BD Pharmingen™ MonoBlock™ Leukocyte Staining Bufferは、Fcブロッキング試薬と併用可能であり、両者を組み合わせることで、色素およびFc受容体媒介性染色に由来する偽陰性と紛らわしいシグナルから真の陽性集団を明確に識別することが可能になります。
ブロッキング試薬を使用せずに、PE‑Cy7標識抗体を用いてマウス骨髄細胞を染色した場合、リンパ系細胞および骨髄系細胞の両方にバックグラウンド染色が認められます。BD Pharmingen™ Mouse Fc Block™による処理では、バックグラウンド染色は一部低減されるものの、蛍光色素に由来する非特異的結合は依然として残存します。一方、BD Pharmingen™ Mouse Fc Block™と BD Pharmingen™ MonoBlock™ Leukocyte Staining Bufferを併用して染色した場合、3種類の異なる抗体アイソタイプすべてにおいて、さらにバックグラウンド染色が低減されます。本製品は、CD11bなどの抗体特異的結合による染色強度を維持しつつ、白血球におけるバックグラウンド染色を効果的に抑制します。
BD Pharmingen™ MonoBlock™ Leukocyte Staining BufferおよびBD Pharmingen™ Mouse Fc Block™を用いたマウス骨髄細胞のフローサイトメトリー解析
本製品は研究用です。疾病の診断・治療または予防に使用することはできません。
CF is a trademark of Biotium, Inc. Cy is a trademark of Global Life Sciences Solutions Germany GmbH or an affiliate doing business as Cytiva.
The BD Pharmingen™ MonoBlock™ Leukocyte Staining Buffer is formulated to block nonspecific binding with cyanine-containing and cyanine-like tandem fluorochromes to leukocyte subsets, especially monocytes and macrophages, in flow cytometry.