磁気分離

何を保持あるいは分離するによって、以下の2種類の選択が可能です。

• 正の細胞選択
• 負の細胞選択

正の細胞選択とは？正の細胞選択が重要である理由

正の選択では、標的集団として収集する必要のある細胞を選択します。この方法では、磁性粒子と、その表面に共有結合した検討対象の亜集団を標的とする抗体を用います。マグネット内に入れられた標的細胞は、磁性粒子に向かって移動し、磁場内に残留しますが、非標識細胞は取り除かれて処分されます。標的細胞は、磁場から除去された後に収集して、意図した用途に使用することができます。

正の細胞選択は、特定細胞の純度・回収率・生存率の点で優れた結果をもたらします。しかし、選択される細胞種や粒子により標的とされる表面抗原によっては、正の選択の結果、細胞が活性化したり、機能的に変化したりするおそれがあります。活性化に至る可能性は低いものの、刺激を受けていない精製細胞を特に必要とする場合には、この磁性粒子誘発活性化が問題となる可能性があります。そのような場合には、負の選択による細胞分離を検討する必要があります。

負の細胞選択とは？負の細胞選択が重要である理由

負の選択は、必要でない細胞を磁気的に分離しつつ、下流の用途（セルソーティングなど）の前に標的細胞集団を吸引・収集することができます。

純度レベルが高く、抗体や粒子が表面に結合していない細胞集団が必要な研究用途には、枯渇や負の選択による濃縮を用います。

この手法では、まず、不要な細胞が発現している抗原に対するモノクローナル抗体を含有するカクテル抗体で、すべての不要な細胞を標識します。非結合抗体を洗い流した後、ステップ2の試薬を使用してこれらの細胞を磁気標識します。標識細胞は磁気の方向に移動し、浮遊液中には純粋な手付かずの細胞亜集団が残るため、この亜集団を収集することができます。負の選択では、大量（95%超）の不要細胞集団を除去することができます¹。

下流のシングルセルマルチオミクス解析には、負の選択を用いた濃縮が推奨されます。そのような事前濃縮は、細胞の操作を最小限に抑えるのに役立ちます。   

細胞分離の結果を左右するのは、以下に挙げる3つの因子です。

細胞分離の結果を左右するのは、以下に挙げる3つの因子です。

• 標的細胞の純度
• 標的細胞の回収率
• 細胞の生存率

標的細胞の純度

不均一集団中の非標的細胞に対する、収集された標的細胞の割合によって、収集された標的細胞分画の純度が決まります。

標的細胞の回収率

元の細胞浮遊液中の標的細胞の合計数に対する、ソーティング後に得られた標的細胞の割合によって、回収率が決まります。

細胞の生存率

生存率とは、分離後の細胞の質を示唆する生存細胞の割合です。

BD Biosciences magnetic separation product portfolio

BD Biosciencesは、磁気細胞分離用のさまざまな試薬と強力なマグネットを取り揃えています。

当社の製品ラインには、 magnetic separation reagents for positive and negative selection of cells. が含まれます。Bリンパ球、CD4・CD8 Tリンパ球、NK細胞、そして特定の種類のマウス樹状細胞を濃縮するための試薬をご用意しています。