Overview
BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer は、サンプルを同時にまたは同じ場所で処理できない場合に、長期間にわたる高品質の生体サンプル保存のニーズに応えるために開発されました。
- 最小限のハンズオンタイムで、ストレスのないワンステップの保存プロトコルです。
- RNA-seq、CITE-seq、フローサイトメトリー、qPCR など、さまざまな下流のトランスクリプトーム、プロテオーム、マルチオームのアプリケーションのために細胞を保存するように最適化されたバッファーです。
- 細胞の生存率を維持し、サンプル中のさまざまな細胞集団を 4 ℃で最大 72 時間保存します。
- 複数の種類のサンプル（PBMC および組織サンプル）にわたり開発およびテスト済み
- 2 つの使いやすいフォーマットで利用可能：50mL ボトルまたは 12x1mL バイアル
BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer の詳細については、データシートをダウンロードしてください
One-Step Sample Preservation Workflow
| Single-Cell Suspension | Tissue | |
推奨使用方法 | Preservation Buffer 1 mL BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer あたり 100～1000 万細胞 | Preservation Buffer 20 mL BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer あたり 30～50mg の組織 |
保管温度 | 4 °C | |
保存期間 | 最大 72 時間 | |
サンプル保存プロト |
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BD Rhapsody™ シングルセル解析システムでのシングルセルキャプチャの変更 | BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer に保存された細胞/組織の場合、単一細胞キャRhapsody™ Single-Cell Analysis System BD Rhapsody™ シン プチャ ワークフローの溶解条件は溶解時間を 2 分から 5 分に変更します。 | |
BD® OMICS-Guard 保存液 で保存したサンプルの CITE-seq におけるBD® AbSeq Enhancer Kit を使用した Ab-oligo シグナルを改善
BD® OMICS-Guard 保存液で保存後に BD® AbSeq Antibody-Oligos で染色する場合は、BD® AbSeq Enhancer Kit を使用して非特異的結合 イベントを低減し、 AbSeq シグナルを増強します。
BD® AbSeq Enhancer Kit を追加した場合と追加しない場合の BD® AbSeq パフォーマンスのヒート マップ。 BD® AbSeq Enhancer Kit をプロトコールに追加しなかった場合 (上)、または保存細胞を使用した場合にプロトコールに追加した場合 (下) の、さまざまな細胞タイプの細胞発現あたりの BD® AbSeq 分子中央値のヒート マップが示されています。 BD® AbSeq Enhancer Kit (下) を使用すると、非特異的なバックグラウンド シグナル (上) が除去され、S/N 比が向上します。これは、コントロール データ (下、左のプロット) とほぼ一致します。
BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer カタログをダウンロードして、BD® AbSeq Enhancer Kit 染色プロトコルをご覧ください
Applications
非保存 (コントロール) ヒト PBMC (0 時間) および 24、48、および 72 時間での BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer で保存したヒト PBMC を使用して、BD Rhapsody™ Single-Cell Analysis System で経時的 CITE-seq 解析を実施しました。 各時点の PBMC を 30 プレックス BD® AbSeq Ab- Oligo パネルで染色しました。 24、48、および 72 時間での保存 PBMC の細胞生存率、遺伝子発現、表面タンパク質発現および細胞集団を分析し、保存されていない対照 PBMC サンプル(n = 2)のと比較しました。 A. 非保存コントロール (0 時間) と 72 時間での BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer 保存 PBMC 間の遺伝子発現相関 (代表的なサンプルを示します、R2 > 0.9)。 B. 非保存コントロール (0 時間) と 72 時間での BD® OMICS-Guard SPBuffer 保存 PBMC 間のタンパク質発現相関 (代表的なサンプルを示します、R2 > 0.8)。細胞あたりの分子の中央値および細胞あたりの遺伝子の 中央値で表される WTA アッセイ感度を、対照の非保存 PBMC（0 時間）と 24、48 および 72 時間の保存 PBMC の間で比較した。 D. 主要な PBMC 細胞タイプ (B、T、NK、樹状細胞および単球) における各 BD® AbSeq Ab-Oligo の細胞あたりの分子の中央値で表される BD® AbSeq の感度。 E. ヒト PBMC の主要な細胞集団の頻度は、非保存対照ヒト PBMC (0 時間) と比較して、さまざまな時点 (24、48、72 時間) にわたって BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer での保存によって維持されました
BD Rhapsody™ Single-Cell Analysis System を使用して、非保存 (コントロール) マウス脾臓組織 (0 時間) および BD® OMICS-Guard Sample Presercation Buffer で保存したマウス脾臓組織 (24、48、72 時間) を使用して、経時的 CITE-seq 解析を実施しました。各時点で単離したマウス脾細胞を 30 プレックス BD® AbSeq Ab-Oligo パネルで染色しました。 24、48、および 72 時間の保存マウス脾臓組織における細胞生存率、遺伝子発現、表面タンパク質発現および細胞集団を分析し、対照マウス脾臓組織(n = 2)と比較した。 A. コントロール (0 時間) と 72 時間後の BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer で保存したマウス脾臓組織間の遺伝子発現相関 (代表的なサンプルを示します、 R2 > 0.9)。 B. 72 時間後のコントロールと BD® OMICS-Guard SPBuffer で保存したマウス脾臓組織間のタンパク質発現相関 (代表的なサンプルを示します、R2 > 0.8)。 C. 細胞あたりの分子の中央値および細胞あたりの遺伝子の中央値で表される WTA アッセイ感度を、対照 (0 時間) と 24、48、および 72 時間の保存マウス脾臓組織の間で比較しました。 D. 主要なマウス脾細胞タイプ (B、T、NK 細胞および好中球) における各 BD® AbSeq Ab-Oligo の細胞あたりの分子量の中央値で表される BD® AbSeq 感度。 E. マウス脾細胞の主要細胞集団の頻度は、コントロールマウス脾細胞 (0 時間) と比較して、さまざまな時点 (24、48、72 時間) にわたって BD® OMICS-Guard Sample Preservation Bufferでの保存によって維持されました。
非保存（コントロール）ヒト PBMC（0 時間）および BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer で保存されたヒト PBMC を使用して、24、48、および 72 時間（n = 2）の時点で経時的フローサイトメトリ ー分析を実施しました。各時点のヒト PBMC を、主要な免疫細胞集団の同定とタンパク質発現分析のために 13 色の蛍光抗体パネルで染色し、非保存対照 (0 時間) と保存 (24、48、および 72 時間) のヒト PBMC を比較しました。 A. 13 色ヒト蛍光抗体パネル。 B. ヒストグラム プロットは、保存されていないコントロール (0 時間) と保存されたヒト PBMC 間の経時的 (24、48、72 時間) の蛍光シグナルによって表される一貫した重要なタンパク質マーカー発現を示します。代表的なサンプルを示します。 C. さまざまな CD45+ 免疫細胞集団の頻度は、非保存対照 (0 時間) と保存ヒト PBMC の間で長期間 (24、 48、72 時間) にわたって一貫したままでした。代表的なサンプルを示します。
非保存 (コントロール) マウス脾臓組織 (0 時間) と BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer で保存したマウス脾臓組織を使用して 24、48、および 72 時間 (n = 2) の時点で経時的フローサイトメトリー分析を実施しました。各時点での単離したマウス脾細胞を、主要な脾細胞集団の同定とタンパク質発現分析のために 11 色の蛍光抗体パネルで染色し、非保存対照 (0 時間) と保存 (24、48、および 72 時間) のマウス脾臓組織を比較しました。 。マウス脾細胞のフローサイトメトリー分析によって明らかになった主要な細胞集団のタンパク質発現レベルと頻度は、72 時間にわたって一貫しており、BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer がフローサイトメトリー分析のために表面タンパク質エピトープと細胞組成を保存できることを示しています。 A. 11 色ヒトマウス蛍光抗体パネル。 B ヒストグラム プロットは、コントロール (0 時間) と保存されたマウス脾臓組織の間の経時的 (24、48、72 時間) の蛍光シグナルによって表される一貫した重要なタンパク質マーカー発現を示します。代表的なサンプルを示します。 C. さまざまな CD45+ 主要脾臓白血球細胞集団の頻度は、コントロール (0 時間) と保存されたマウス脾臓組織の間で、経時的 (24、48、72 時間) にわたって一貫したままでした。代表的なサンプルを示します。
qPCR を使用して、新鮮なヒト PBMC サンプルと保存されたヒト PBMC サンプルの間で 84 のストレス関連遺伝子の発現を比較しました (n = 2)。 48 時間の保存後、ストレス関連遺伝子の有意な発現変化は観察されず、BD® OMICS-Guard Sample Preservation Buffer を使用したストレスのない保存ワークフローが示されました。 A. 非保存ヒト PBMC と 48 時間保存したヒト PBMC における 84 個のストレス関連遺伝子の同等の発現 (両方のドナーからの PBMC における遺伝子発現相関 R2 > 0.9)。 B.新鮮な PBMC と比較して、保存された PBMC サンプルにおけるストレス関連遺伝子の発現の変化倍率が低いことを示すヒートマップ。
研究用です。治療・診断には利用できません。
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BD-109916 (v2.0) 1223
