BD Horizon RealYellow™ 743 Reagents

人全血使用 CD279（EH12.1）RY743 与 CD3 FITC 染色，并在 BD FACSymphony™ A5 SE 上采集，使用 FlowJo™（v10）进行光谱解混。

A）刺激后的 BALB/c 小鼠脾细胞使用 BUV395 Rat Anti-Mouse CD4 与 RY743 Rat Anti-Mouse IFN-γ 染色（依据 Immunofluorescent Staining of Intracellular Cytokines for Flow Cytometric Analysis protocol.
 

B) 人 PBMC 使用 FoxP3 RY743 + CD4 BUV395（左）或刺激后的人 PBMC 使用 IL-2 RY743 + CD3 BUV395（右）染色。样本在 BD FACSymphony™ A5 SE 上采集并使用 FlowJo™ 进行光谱解混。

PBMC 使用抗 CD4 荧光染料染色，并计算相似性指数。所有单色染色图均在 BD FACSymphony™ A5 SE 上采集，并使用 FlowJo™ 分析。

 A) RY743 与 RB744 的归一化发射光谱。数据使用人 CD4（clone SK3）抗体并在 BD FACSDiscover™ S8 细胞分选仪上采集。

B)裂解后的全血分别使用 CD3-RY743（左）或 CD4-RY743（右）与 CD19-RB744 进行染色。所有细胞样本均在 BD FACSymphony™ A5 SE 细胞分析仪上采集，并使用 FlowJo™ 软件进行补偿分析。

RY703、RY743 和 RY775 的标准化发射光谱（基于人 CD4（clone SK3）抗体，在 BD FACSDiscover™ S8 细胞分选仪上采集）。

BD Horizon™ RY743在货架型试剂与 BD OptiBuild™ 现配试剂之间表现出稳定性能，并在不同批次之间保持良好一致性。实验中，人全血分别使用三批不同染料批次的 RY743-CD3（UCHT1，左图）或 RY743-CD4（SK3，右图）进行染色，随后以 BD Pharm Lyse™ 溶血缓冲液进行溶血处理。所有样本均在 Cytek™ Aurora 光谱分析仪上采集；CD3 与 CD4 的实验在不同条件下独立完成。