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BD® 补偿微球涂有免疫球蛋白，它可以结合大多数荧光结合抗体，作为细胞的替代。微球易于使用，能产生每个荧光的峰值。然而，所有微球局限性在于，由于它们不是真实的染色细胞，溢漏值可能与染色细胞不同。
BD®补偿微球具有种属和κ链特异性。确保您的BD®补偿微球与您检测的试剂的种属和轻链都兼容。我们提供的BD®补偿微球具有多种种类和规格（货号552843、552844、552845；BD®补偿微球 Plus，货号：560497、560499）
不能，补偿控制试剂的发射光谱（溢漏值%）应与实验中使用的试剂相同。即使类似的荧光染料，如FITC，Alexa Fluor™ 488和GFP，发射光谱也不同，这可能导致每种染料的溢漏值不同。这也适用于活/死细胞染料，如PI、7-AAD和BD Horizon™ 等染料
不同批次的串联染料的溢漏值显著不同。因此，我们建议对串联染料进行批次特定补偿。在您的实验中，每种串联染料都应有补偿调节。
我们建议用与样品制备相同的方法处理补偿调节。这包括在同一天制备、使用相同试剂（例如，相同的缓冲液，用BD Horizon Brilliant™ Stain Buffer（BSB）进行补偿调节等等），以及相同的培养时间和储存时间。用相同试剂在不同时间生成的数据可能存在差异，从而影响样品的补偿结果。
是。在同一实验中使用两种或两种以上BD-Horizon™染料时，请使用BD-Horizon™ Stain Buffer（BSB），以防止染料相互作用的造成的影响。当在多色实验中使用BSB时，最好在单色补偿管中也使用BSB。该缓冲液与BD®补偿微球兼容，但尚未用其他供应商提供的补偿微球进行检测。
当使用两种或两种以上BD Horizon Brilliant™试剂时，应使用BD Horizon™ Stain Buffer或BD Horizon™ Stain Buffer Plus，以进行多色免疫荧光染色和流式细胞术分析。用BD Horizon Brilliant Violet™ 421 (BV421)小鼠抗人CD4和BD Horizon™ BV711小鼠抗人CD19抗体，对人全血进行染色。用BD FACS™裂解液裂解红细胞（货号349202）。等高线图显示CD4 vs CD19相关表达，与未用Stain Buffer染色的细胞（左图）相比，用BD Horizon™ Stain Buffer染色（货号563794/566349；右图）的主要淋巴细胞群体显示为预期结果（虚线）。上述结果用BD LSRFortessa™ Cell Analyzer System进行流式细胞技术分析。
在补偿获取期间，荧光参数的电压必须保持不变，但FSC和SSC电压可以改变。在结合细胞和微球进行补偿时，这尤其有用，这些细胞和微球可能不在FCS/SSC图的相同位置。
通常，当使用细胞创建补偿时，使用阴性管来定义阴性细胞群。当结合细胞和微球时，对于使用细胞单染管作为补偿对照的荧光，创建阴性门P3。这也适用于使用微球作为对照的染料（除7-AAD和其它区分细胞死活的染料外）。
在正补偿控制的亮度范围内时，计算出的补偿值才正确。如果补偿控制偏离范围，我们建议滴定加入对照组的抗体量，而不是调整PMTV。
这些染料与BD®补偿微球的搭配效果不是最佳，用BD®补偿微球得到的染料之间溢漏值可能无法为细胞提供正确的补偿。细胞单染管对照可提供更准确的补偿结果。
