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BD Horizon RealBlue 824 试剂

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明亮、干净的染料


BD Horizon RealBlue824(RB824)试剂基于创新的、激光特异性的荧光染料开发,主要由 488 nm 蓝色激光激发,并能够提供:

  • 极低的交叉激发
  • 高亮度荧光,适用于低表达水平的表面和细胞内标记物检测
  • 在蓝色激光通道下的近红外(NIR)检测位置
 
RB824 vials
performance1

将 RB824 与低至中等抗原表达的标记物搭配使用,以充分发挥蓝光激光线的性能

RB824 specifications

 

格式激发峰发射峰光谱传统相对亮度Spillover* (1低,4高)替代
RB824488 nm824 nm 1PerCP/Fire 806, StarBright Blue 810
 

* 数值可能因仪器配置与设置而变化。溢出等级基于五激光光谱仪器上的交叉激发,不包含对相邻探测器的溢出。
 

 

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性能


BD Horizon RealBlue824 试剂在 561 nm 黄绿激光下表现出极低的交叉激发



RB824 具有极低的交叉激发

 

RB824 has minimal cross-laser excitation

RB824、PerCP/Fire 806、StarBright™ B810(SBB810)和 NovaFluorB800(NFB800)的标准化发射谱。 PBMC 使用 human CD4 SK3 抗体染色,并在 BD FACSDiscoverS8 细胞分选仪上采集数据。

与 PerCP/Fire806 和 StarBrightBlue 810 相比,RB824 在黄绿激光染料上的扩散更小
RB824 minimal spread into yellow-green laser dyes

全血使用 CD4 RB824、StarBrightBlue 810(SBB810)、PerCP/Fire806、StarBrightYellow 800(SBY800)或 PE/Fire™ 810 染色,并使用 BD Pharm Lyse溶血缓冲液进行溶血。图中为单色叠加图:

A)RB824 或 SBB810 与 SBY800 的叠加。

B)RB824 或 PerCP/Fire806 与 PE/Fire810 的叠加。样本在 CytekAurora 光谱分析仪上采集,并使用 FlowJo软件进行光谱解混。

 

 

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应用

多色流式细胞术

BD HorizonRB824 试剂在 BD FACSDiscover A8 上的 24 色 T 细胞活化 Panel 中表现出良好分辨率

T 细胞亚群 gating 策略
RB824 Reagents Resolution in 24-Color T-Cell Activation Panel


从健康供体分离 PBMC,并分为两个条件:未刺激组和使用 CytoStim(Miltenyi Biotec)刺激组。24 小时后,收集两组样本并用 CD45 进行标记。在刺激组样本中加入 CAR T 细胞。随后使用包含 BD Horizon RealViolet828(RV828)和 RB824,以及 BD CD19 CAR 检测试剂的 24 色 T 细胞活化 Panel 的剩余 23 个标记物进行染色,并在 BD FACSDiscover A8 细胞分析仪上进行分析。

A)未刺激 PBMC 的 T 细胞表型分析的 gating 策略。

B)伪彩图显示在与 CAR T 细胞混合的刺激 PBMC 样本中检测 CD19 CAR⁺ T 细胞。等高线图显示未刺激 PBMC、刺激 PBMC 和 CD19 CAR⁺ T 细胞中记忆、活化和抑制性标记物的表达。

 

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24 色人 T 细胞活化 Panel 的荧光染料与标记物分配

 

 SpecificityCloneFluorochrome
UV
349 nm

CD8

RPA-T8

BUV395

CD45

HI30

BUV496

CD25

2A3

BUV615

Violet
405 nm

CCR7

2-L1-A

BV421

CD45RA

HI100

BV480

Viability

N/A

FVS575V

CD20

2H7

BV786

CD3

UCHT1

RV828

Blue
488 nm

CD28

CD28.2

BB515

CD95

DX2

RB613

CCR6

11A9

RB670

CXCR3

1C6/CXCR3

RB705

CD127

HIL-7R-M21

RB744

KLRG1

Z7-205.rMAb

RB780

CD45RO

UCHL1

RB824

Yellow-Green
561 nm

TIM-3

7D3

RY586

CD69

FN50

RY610

TCRγδ

11F2

RY703

CD56

B159

RY743

CD16

3G8

RY743

CCR4

1G1

RY775

Red
637 nm

CD19
CAR T
DET

N/A

AF647

PD-1

EH12.1

RR688

TIGIT

TgMab-2

R718

CD4

RPA-T4

APC-H7


Fluorochrome marker assignment for a 24-color spectral flow cytometry panel acquired on the BD FACSDiscoverA8 Cell Analyzer.
  

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缓冲兼容性

BD HorizonRB824 试剂与多种固定破膜体系兼容

BuffersResults
BD FACS™ Lysing Solution and BD Pharm Lyse™ Lysing BufferCompatible
CellBlox™ Blocking BufferCompatible
BD Cytofix™ Fixation BufferStable at least 24 hours
1% PFAStable at least 24 hours
BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation and Permeabilization SolutionCompatible with antibody staining before and after fixation
BD FACS™ Permeabilizing Solution 2Compatible with antibody staining before and after fixation
BD Phosflow™ Perm Buffer IIICompatible with antibody staining before and after fixation
EDTA and HeparinCompatible
BD Horizon™ Brilliant Stain Buffer (BSB)Compatible
 

  

  

BD 流式细胞仪为 1 类激光产品。仅用于科研目的,不用于诊断或治疗程序。

CF 为 Biotium, Inc. 的商标。Cy 为 Cytiva 旗下 Global Life Sciences Solutions Germany GmbH 或其关联企业的商标。CellBlox 为 Thermo Fisher Scientific 的商标。