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BD Horizon RealBlue™ 780(RB780)试剂采用创新型激光特异性荧光染料,主要由488 nm蓝色激光激发,具备以下优势:
- 极少的561 nm黄绿色激光交叉激发
- 高亮度荧光染料,支持检测低表达的表面和胞内标志物
- 与PE-Cy7相比,可降低单核细胞背景信号
性能
BD Horizon RealBlue™ 780试剂的561 nm黄绿色激光交叉激发极少,较PE-Cy7具有更低背景
RB780试剂的交叉激光激发极少
RB780与PE-Cy7荧光染料的标准化发射光谱。在BD FACSDiscover™ S8细胞分选仪上采集人CD4 SK3抗体。
与PE-Cy7相比,RB780黄绿色激光检测器的溢漏扩散减少
使用BD Horizon™ RB780人CD4(SK3)试剂对人全血进行染色,并在BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞仪上进行采集和补偿。为PE-Cy7设置了双指数标度并应用于RB780,以突出显示选定通道中荧光扩散的变化。
与PE-Cy7相比,BD Horizon™ RB780试剂背景更低
分别使用PE-Cy7或BD Horizon™ RB780偶联的人CD3(UCHT1)试剂、CD4(SK3)、人CD8(RPA-T8)或人CD19(SJ25C1)对人全血进行染色,随后使用BD FACS™流式细胞分析用溶血素进行溶血处理。所有特异性检测均在BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞仪的B810检测器上进行分析。
应用
使用PE、PE-Cy7及BD Horizon™ RB780小鼠抗人CD279(PD-1)试剂进行染色。PE在YG585检测器中检测,PE-Cy7与RB780均在B810检测器中检测。通过BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞仪采集数据并进行补偿。
在存在BD GolgiStop™蛋白质转运抑制剂的情况下,使用PMA和离子霉素对人外周血单个核细胞(PBMC)刺激5小时(顶图)或不刺激(底图),然后分别使用BD Horizon™ RB780(左图,0.125 µg)或PE-Cy7(右图,0.25 µg)IFN-γ(克隆B27)以及匹配的同种型对照品进行染色。通过BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞仪采集样本,并使用B810检测器进行检测。
来自健康供体的PBMC经单色CD4(RB780或PE-Cy7)染色后进行光谱解混所得的双变量叠加图。通过BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞仪采集样本,并使用FlowJo™(版本10.8)软件进行光谱解混。
BD Horizon™ RB780试剂表现出稳定的性能,在备货型生产试剂和BD OptiBuild™按需生产试剂之间具有批间一致性。分别使用七个不同染料批次的人CD4(SK3)RB780对人全血进行染色(左图),随后使用BD FACS™流式细胞分析用溶血素进行溶血处理。使用六种不同染料批次的小鼠CD8a(53-6.7)对小鼠脾细胞进行染色(右图)。所有特异性检测均在BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞仪上进行。
多色流式细胞术
在BD FACSLyric™流式细胞仪上运行的12色T细胞抑制性Panel中,BD Horizon™ RB780试剂可用于进行有效解析
T细胞亚群的圈门方案
使用12色T细胞抑制性Panel对健康PBMC进行染色,并在BD FACSLyric™流式细胞仪上进行采集。每个图上方的标注显示了其来源的亲本细胞圈门方案;各象限中的数字表示细胞群的频率;T细胞亚群定义为:N,初始性;CM,中央记忆性;EM,效应记忆性;EMRA,效应记忆RA+性;SCM,干细胞样记忆性。
在光谱流式细胞术中,RB780试剂可与PE-Cy7结合使用
在多色Panel中,RB780试剂可与PE-Cy7结合使用,以识别稀有细胞群
在多色Panel中,BD Horizon™ RB780试剂可与PE-Cy7结合使用,以识别稀有细胞群。CD123 BD Horizon™ RB780试剂可与CD303 PE-Cy7在一部分人浆细胞样树突状细胞(pDC)亚群中进行共表达。流式图显示了健康PBMC样本中从谱系阴性CD14-CD16-、HLA-DR+ CD11c-细胞群中分化出的CD123+ CD303+细胞,即pDC群体的清晰区分情况。使用Panel试剂及Human BD Fc Block™试剂对样本进行染色,并在BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞仪上进行分析。使用FlowJo™ v10.8软件进行光谱解混与分析。
缓冲液兼容性
BD Horizon RealBlue™ RB780试剂可与多种固定系统和破膜系统广泛兼容
| 缓冲液 | 结果 |
| BD FACS™流式细胞分析用溶血素和BD Pharm Lyse™裂解缓冲液 | 兼容 |
| CellBlox™ Blocking Buffer | Compatible |
| BD Cytofix™固定缓冲液 | 至少在24小时内稳定 |
| 1%多聚甲醛(PFA) | 1%多聚甲醛(PFA) |
| BD Cytofix/Cytoperm™固定破膜剂 | 与固定前后抗体染色兼容 |
| BD FACS™破膜剂2 | 与固定前后抗体染色兼容 |
| BD Phosflow™破膜缓冲液III | 与固定前后抗体染色兼容 |
| EDTA和肝素 | 兼容 |
| BD Horizon™ Brilliant染色缓冲液(BSB) | 兼容 |
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Brochures
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Poster
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Performance Guide and Chart
BD流式细胞仪是Ⅰ类激光产品。仅供研究使用,不用于诊断或治疗程序。
BD FACSLyric™流式细胞仪仅限科研使用,可配合BD FACSuite™应用程序实现最多12色检测。不用于诊断或治疗程序。
CF是Biotium, Inc.的商标,Cy是Global Life Sciences Solutions Germany GmbH或其附属公司Cytiva的商标。CellBlox为Thermo Fisher Scientific的商标。