PE-Cy5的优效替代方案
BD Horizon RealBlue™ 670（RB670）试剂采用创新型激光特异性荧光染料，主要由488 nm蓝色激光激发，具备以下优势：
- 降低来自561 nm黄绿色激光的交叉激光激发
- 高亮度荧光染料，支持检测低表达的表面和胞内标志物
- 与PE-Cy5、NovaFluor™ Blue 660和StarBright™ Blue 675相比，溢漏更少
- 与PE-Cy5相比，可降低单核细胞背景信号
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性能
BD Horizon RealBlue™ 670试剂是PE-Cy5、StarBright™ Blue 675和NovaFluor™ Blue 660更优替代方案
RB670试剂可降低交叉激光激发
RB670、PE-Cy5、SBB675与NFB660-120S荧光染料的标准化发射光谱。在BD FACSDiscover™ S8细胞分选仪上采集人CD4 SK3抗体。
与PE-Cy5相比，RB670试剂的单核细胞背景更低
使用BD Horizon™ RB670或PE-Cy5标记人CD8（克隆RPA-T8）抗体对人PBMC进行染色，随后使用BD Pharm Lyse™裂解缓冲液进行红细胞裂解，并在BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞仪上进行采集，使用FlowJo™软件进行分析。
应用
BD Horizon™ RB670试剂可用于解析低表达表面标志物
使用BD Horizon™ RB670 CD279（EH12.1）试剂对人全血样本进行染色，并使用BUV395 CD3（UCHT1）试剂进行共染色，随后使用BD Pharm Lyse™裂解缓冲液进行红细胞裂解，并通过BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞仪采集，使用FlowJo™软件进行分析。
BD Horizon™ RB670试剂可用于解析胞内标志物
首先使用BUV395 CD4（SK3）对人PBMC进行染色，其次采用BD Pharmingen™转录因子缓冲液套装进行固定和破膜，随后使用RB670 FoxP3（259D/C7）进行染色；之后在BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞仪上进行采集，并使用FlowJo™软件进行分析。
RB670在备货型生产试剂和BD OptiBuild™按需生产试剂之间具有批间一致性
BD Horizon™ RB670试剂表现出稳定的性能，在备货型生产试剂和BD OptiBuild™按需生产试剂之间具有批间一致性。分别使用几个不同染料批次的RB670对人CD3（UCHT1，左图）或CD4（SK3，右图）对人全血进行染色，随后使用BD FACS™流式细胞分析用溶血素进行溶血处理。所有特异性检测均通过BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞仪采集。
多色流式细胞术
在BD FACSDiscover™ S8细胞分选仪采集的18色光谱流式细胞术Panel中，BD Horizon™ RB670具有出色的分辨率
在18色人谱系Panel中，BD Horizon RealYellow™可与RealBlue™荧光染料有效结合使用
用活性染料和细胞表面标志物抗体对人类外周血单个核细胞进行染色。在BD FACSDiscover™ S8细胞分选仪上分析细胞，并使用FlowJo™软件v10.10对数据进行分析。图中展示了在排除死细胞和粘连细胞后用于检测NK细胞亚群，并对代表性亚群进行表型分析的圈门策略。
18色光谱流式细胞术Panel的荧光染料标志物分配
| 特异性 | 克隆 | 荧光染料 | |
|---|---|---|---|
| UV 349 nm | CD4 | SK3 | |
HLA-DR | G46-6 | ||
CD8 | RPA-T8 | ||
| Violet 405 nm | CCR7 | 2-L1-A | |
CD38 | HIT2 | ||
Live/dead | N/A | ||
CD14 | MφP9 | ||
| Blue 488 nm | CD57 | NK-1 | |
CD16 | 3G8 | ||
CD56 | B159 | ||
CD19 | SJ25C1 | ||
TCR γδ | 11F2 | ||
CD127 | A019D5 | ||
| Yellow-Green 561 nm | NKG2C | 134591 | |
CD3 | UCHT1 | ||
CD25 | 2A3 | ||
| Red 637 nm | Vδ2 TCR | 123R3 | |
CD45RA | HI100 |
通过BD FACSDiscover™ S8细胞分选仪采集的18色光谱流式细胞术Panel的荧光染料标志物分配。
缓冲液兼容性
BD Horizon RealBlue™ 670试剂可与多种固定系统和破膜系统广泛兼容
| 缓冲液 | 结果 |
| BD FACS™流式细胞分析用溶血素和BD Pharm Lyse™裂解缓冲液 | 兼容 |
| BD Cytofix™固定缓冲液 | 至少在24小时内稳定 |
| 1%多聚甲醛（PFA） | 至少在24小时内稳定 |
| BD Cytofix/Cytoperm™固定破膜剂 | 与固定前后抗体染色兼容 |
| BD FACS™破膜剂2 | 与固定前后抗体染色兼容 |
| BD Phosflow™破膜缓冲液III | 与固定前后抗体染色兼容 |
| EDTA和肝素 | 兼容 |
| BD Horizon™ Brilliant染色缓冲液（BSB） | 兼容 |
资源
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Performance Guide and Chart
BD流式细胞仪是Ⅰ类激光产品。仅供研究使用，不用于诊断或治疗程序。
CF是Biotium, Inc.的商标，Cy是Global Life Sciences Solutions Germany GmbH或其附属公司Cytiva的商标。CellBlox为Thermo Fisher Scientific的商标。