针对T细胞特征和深度免疫表型的策略和考量
T细胞在其发育过程中形成独特的表面标志物和细胞因子信号。已根据T细胞亚群的表型和功能特征鉴定出不同类型的T细胞亚群。精心设计的流式细胞仪panel与一些基本表面标志物相结合，可在高水平表征T细胞。但是，为了对不同亚型进行更深入的表征，仅仅有一个基本的panel是不够的。需要开发更大的多色panel，并添加额外的drop-in荧光染料。通过添加新的荧光染料来扩展现有的流式细胞仪panel可能具有挑战性，因为drop-in会带来溢漏。溢漏可能会损害panel的分辨率，最终要求彻底重新设计一个新的panel，这会影响成本、时间和深入定义细胞生物学的能力。
独立panel和预优化骨架panel有何不同？
有多种独立panel可用于T细胞表征。但这些panel并不是专门为drop-in而设计。如果不严格遵守panel设计规则，这些panel的扩展可能会导致骨架和/或panel通道的分辨率不够理想。此外，独立panel还包含一些最常用的荧光染料，而非让其保持自由状态以确保drop-in的灵活性。
采用战略性设计的预优化骨架panel解决了这些问题。独立panel和骨架panel使用不同的方法，虽然两者都依赖于panel设计的基本规则，例如对荧光染料亮度、溢漏以及抗原密度和共表达的考量，但是两者在几个实际方面有所不同：
| 独立Panel | 骨架Panel |
|---|---|
| 设计为无需修改或添加即可使用 | 前瞻性设计，可通过不同的drop-ins拓展研究 |
| 易于设计——利用光谱分离的荧光染料 | 具有挑战性的设计——使用具有高溢漏并具有挑战性的荧光染料 |
| 难以拓展——对剩余荧光染料的选择具有挑战性 | 易于拓展——光谱分离的荧光染料可用于drop-in |
| 可能需要重新设计panel以添加新标记物 | 需要最小的panel设计以向骨架添加新标记物 |
构建骨架panel的考量
构建骨架panel时，应考虑以下四个重要标准：
- 骨架panel应清楚地分辨所有相关的细胞亚群
- Panel不应影响推荐的drop-in荧光染料的分辨率
- Drop-in荧光染料不应影响骨架Panel的分辨率
- Drop-in荧光染料不应相互影响
碧迪医疗生物科学新开发的BD Horizon™人T细胞骨架Panel
碧迪医疗生物科学已开发的BD Horizon™人T细胞骨架Panel包含五瓶独立的荧光染料偶联抗体，主要针对T细胞标志物CD3、CD4、CD8、CD45RA、CD197（CCR7）——传统上用于评估T细胞成熟度和鉴定初始细胞亚群和中央记忆（CM）、效应记忆（EM）细胞亚群以及效应记忆RA（EMRA）细胞亚群。1,2此套件还包含BD Horizon™ Brilliant染色缓冲液，搭配使用可实现最佳性能。
此外，BD Horizon™人T细胞骨架Panel可作为研究人员开展深入研究的起点，例如针对CD4⁺辅助性T细胞以及通过添加特定drop-in进一步鉴定调节性T细胞的研究。
使用预优化BD Horizon™人T细胞骨架Panel的优势
BD Horizon™人T细胞骨架Panel 采用精心设计，可根据仪器配置与多达五种推荐的drop-in荧光染料与您选择的抗原配对，实现最简便的panel设计流程和最小的分辨率损失。
其经过严格测试，并提供了应用数据，可在使用前测量panel的性能。通过简化panel设计流程和提供经测试和预优化的panel，该产品有助于您在实验中建立效率和信心。
- 骨架Panel的战略设计允许使用推荐的荧光染料drop-ins进行拓展，同时不会影响分辨率
- 由于溢漏扩散和抗原共表达不存在问题，简化了添加新标志物的panel设计流程
- 仍然需要适当匹配荧光染料亮度和抗原密度，以确保最佳分辨率
- 推荐的drop-in荧光染料的数量可能会根据流式细胞仪配置而变化
- 应用数据证明了正确设计的骨架Panel的灵活性和清晰的分辨率
如果您有兴趣了解更多有关T细胞骨架panel的信息、查看性能数据、访问相关方案以及获得更多提示和技巧，请下载BD Horizon™人T细胞骨架Panel电子书。
