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BD Horizon RealViolet™ 828 Reagents

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由紫激光激发的近红外荧光染料,具有最低交叉激发


BD Horizon RealViolet™ 828(RV828)试剂利用创新的、激光特异性的荧光染料,主要由 405 nm 紫光激光激发,可提供:

  •  极低的交叉激发
  • 中等亮度,适用于检测中等到高表达的细胞表面和细胞内标记物
  •  在紫激光通道下的近红外(NIR)检测位置
 
RV828 Vials
performance1

RV828 可为中高表达标记物提供更强检测,在光谱流式细胞仪上实现最佳性能

RV828 Specifications

 

格式激发峰发射峰光谱传统相对亮度Spillover* (1低,4高)替代
RV828412 nm828 nm✓- 1Qdot™ 800, NovaFluor™ V800
 
*数值可能因仪器配置与设置而变化。溢出等级基于五激光光谱仪器上的交叉激发,不包含对相邻探测器的溢出。


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性能

BD Horizon RealViolet™ 828 试剂具有极低的交叉激发


RV828 具有最小交叉激发
RV828 Excitation 488NM Blue Laser

CD4(SK3)RV828、NovaFluor™ V800(NFV800)及 CD4(S3.5)Qdot™ 800 的标准化发射谱。数据采集于 BD FACSDiscover™ S8 细胞分选仪。

RV828 的荧光扩散低于 Qdot™ 800
RV828 reduced cross laser excitation

PBMC 使用以下试剂进行单色染色:CD4 RV828、Qdot™ 800、BUV805、RB824、SBY800 或 APC/Fire™ 810。图中显示 RV828 与 Qdot™ 800 的交叉激发扩散。数据采集于 Cytek™ Aurora 光谱分析仪,使用 FlowJo™ 软件进行光谱解混。

 

 

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应用

多色流式细胞术

RV828 在 BD FACSDiscover™ A8 上的 24 色 T 细胞活化 panel 中具有良好分辨率



T 细胞亚群的 gating 策略
Reagents Resolution in 24-Color T Cell Activation Panel

从健康供体中分离 PBMC,并将其分为两种条件:未刺激组和使用 CytoStim™(Miltenyi Biotec)刺激的组。经过 24 小时后,收集两组样本并使用 CD45 进行标记。向刺激样本中加入 CAR T 细胞。然后使用包含 BD Horizon RealViolet™ 828 和 BD Horizon RealBlue™ 824(RB824)以及 BD® CD19 CAR 检测试剂的 24 色 T 细胞活化 Panel 中剩余的 23 种标记物对样本进行染色,并在 BD FACSDiscover™ A8 细胞分析仪上进行分析。

 

A)未刺激 PBMC 的 T 细胞表型分析的 gating 策略。

 

B)伪彩图显示了在与 CAR T 细胞混合的刺激 PBMC 样本中检测 CD19 CAR⁺ T 细胞的情况。等高线图显示了未刺激 PBMC、刺激 PBMC 以及 CD19 CAR⁺ T 细胞中记忆、活化和抑制性标记物的表达情况。

24 色人 T 细胞活化 panel 的荧光染料与标记物分配
 
 SpecificityCloneFluorochrome
UV
349 nm

CD8

RPA-T8

BUV395

CD45

HI30

BUV496

CD25

2A3

BUV615

Violet
405 nm

CCR7

2-L1-A

BV421

CD45RA

HI100

BV480

Viability

N/A

FVS575V

CD20

2H7

BV786

CD3

UCHT1

RV828

Blue
488 nm

CD28

CD28.2

BB515

CD95

DX2

RB613

CCR6

11A9

RB670

CXCR3

1C6/CXCR3

RB705

CD127

HIL-7R-M21

RB744

KLRG1

Z7-205.rMAb

RB780

CD45RO

UCHL1

RB824

Yellow-Green
561 nm

TIM-3

7D3

RY586

CD69

FN50

RY610

TCRγδ

11F2

RY703

CD56

B159

RY743

CD16

3G8

RY743

CCR4

1G1

RY775

Red
637 nm

CD19
CAR T
DET

N/A

AF647

PD-1

EH12.1

RR688

TIGIT

TgMab-2

R718

CD4

RPA-T4

APC-H7



表格注:该 Panel 于 BD FACSDiscover™ A8 上采集。


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缓冲体系兼容性

BD Horizon™ RV828 试剂兼容多种固定和透化体系

BuffersResults
BD FACS™ Lysing Solution and BD Pharm Lyse™ Lysing BufferCompatible
CellBlox™ Blocking BufferCompatible
BD Cytofix™ Fixation BufferStable at least 24 hours
1% PFAStable at least 24 hours
BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation and Permeabilization SolutionCompatible with antibody staining before and after fixation
BD FACS™ Permeabilizing Solution 2Compatible with antibody staining before and after fixation
BD Phosflow™ Perm Buffer IIICompatible with antibody staining before and after fixation
EDTA and HeparinCompatible
BD Horizon™ Brilliant Stain Buffer (BSB)Compatible
 

    

   

BD 流式细胞仪为 Class 1 激光产品。仅供科研使用,不用于诊断或治疗程序。