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BD Horizon RealViolet 828 Reagents

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由紫激光激发的近红外荧光染料,具有最低交叉激发


BD Horizon RealViolet828(RV828)试剂利用创新的、激光特异性的荧光染料,主要由 405 nm 紫光激光激发,可提供:

  •  极低的交叉激发
  • 中等亮度,适用于检测中等到高表达的细胞表面和细胞内标记物
  •  在紫激光通道下的近红外(NIR)检测位置
 
RV828 Vials
performance1

RV828 可为中高表达标记物提供更强检测,在光谱流式细胞仪上实现最佳性能

RV828 Specifications

 

格式激发峰发射峰光谱传统相对亮度Spillover* (1低,4高)替代
RV828412 nm828 nm- 1Qdot 800, NovaFluor V800
 
*数值可能因仪器配置与设置而变化。溢出等级基于五激光光谱仪器上的交叉激发,不包含对相邻探测器的溢出。


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性能

BD Horizon RealViolet828 试剂具有极低的交叉激发


RV828 具有最小交叉激发
RV828 Excitation 488NM Blue Laser

CD4(SK3)RV828、NovaFluorV800(NFV800)及 CD4(S3.5)Qdot800 的标准化发射谱。数据采集于 BD FACSDiscoverS8 细胞分选仪。

RV828 的荧光扩散低于 Qdot800
RV828 reduced cross laser excitation

PBMC 使用以下试剂进行单色染色:CD4 RV828、Qdot800、BUV805、RB824、SBY800 或 APC/Fire810。图中显示 RV828 与 Qdot800 的交叉激发扩散。数据采集于 CytekAurora 光谱分析仪,使用 FlowJo软件进行光谱解混。

 

 

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应用

多色流式细胞术

RV828 在 BD FACSDiscoverA8 上的 24 色 T 细胞活化 panel 中具有良好分辨率



T 细胞亚群的 gating 策略
Reagents Resolution in 24-Color T Cell Activation Panel

从健康供体中分离 PBMC,并将其分为两种条件:未刺激组和使用 CytoStim(Miltenyi Biotec)刺激的组。经过 24 小时后,收集两组样本并使用 CD45 进行标记。向刺激样本中加入 CAR T 细胞。然后使用包含 BD Horizon RealViolet828 和 BD Horizon RealBlue824(RB824)以及 BD® CD19 CAR 检测试剂的 24 色 T 细胞活化 Panel 中剩余的 23 种标记物对样本进行染色,并在 BD FACSDiscoverA8 细胞分析仪上进行分析。

 

A)未刺激 PBMC 的 T 细胞表型分析的 gating 策略。

 

B)伪彩图显示了在与 CAR T 细胞混合的刺激 PBMC 样本中检测 CD19 CAR⁺ T 细胞的情况。等高线图显示了未刺激 PBMC、刺激 PBMC 以及 CD19 CAR⁺ T 细胞中记忆、活化和抑制性标记物的表达情况。

24 色人 T 细胞活化 panel 的荧光染料与标记物分配
 
 SpecificityCloneFluorochrome
UV
349 nm

CD8

RPA-T8

BUV395

CD45

HI30

BUV496

CD25

2A3

BUV615

Violet
405 nm

CCR7

2-L1-A

BV421

CD45RA

HI100

BV480

Viability

N/A

FVS575V

CD20

2H7

BV786

CD3

UCHT1

RV828

Blue
488 nm

CD28

CD28.2

BB515

CD95

DX2

RB613

CCR6

11A9

RB670

CXCR3

1C6/CXCR3

RB705

CD127

HIL-7R-M21

RB744

KLRG1

Z7-205.rMAb

RB780

CD45RO

UCHL1

RB824

Yellow-Green
561 nm

TIM-3

7D3

RY586

CD69

FN50

RY610

TCRγδ

11F2

RY703

CD56

B159

RY743

CD16

3G8

RY743

CCR4

1G1

RY775

Red
637 nm

CD19
CAR T
DET

N/A

AF647

PD-1

EH12.1

RR688

TIGIT

TgMab-2

R718

CD4

RPA-T4

APC-H7



表格注:该 Panel 于 BD FACSDiscoverA8 上采集。


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缓冲体系兼容性

BD HorizonRV828 试剂兼容多种固定和透化体系

BuffersResults
BD FACSLysing Solution and BD Pharm LyseLysing BufferCompatible
CellBlox Blocking BufferCompatible
BD CytofixFixation BufferStable at least 24 hours
1% PFAStable at least 24 hours
BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation and Permeabilization SolutionCompatible with antibody staining before and after fixation
BD FACSPermeabilizing Solution 2Compatible with antibody staining before and after fixation
BD PhosflowPerm Buffer IIICompatible with antibody staining before and after fixation
EDTA and HeparinCompatible
BD HorizonBrilliant Stain Buffer (BSB)Compatible
 

    

   

BD 流式细胞仪为 Class 1 激光产品。仅供科研使用,不用于诊断或治疗程序。