第3场比赛：光稳定性
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荧光染料暴露在光照下会发生光漂白现象，变得暗淡，导致分辨率降低。此外，部分染料暴露在光照下会发生光谱变化。在此次荧光染料大对决中，我们将评估光对荧光染料的影响，这些荧光染料主要由黄绿色激光激发，其峰值发射波长约为700 nm。
用BD Horizon™ RY703 Mouse Anti-Human CD4 SK3（货号571427）、Bio-Rad StarBright™ Yellow 720 Mouse Anti-Human CD4 RPA-T4或Thermo Fisher NovaFluor™ Y700 Mouse Anti-Human CD4 SK3试剂对人全血进行染色。用BD Pharm Lyse™ Lysing Buffer（货号555899）裂解红细胞。染色完成后，将细胞避光置于室温下（紫色直方图）或置于室温下200 lux的LED灯下2小时（蓝色直方图）或4小时（绿色直方图）。直方图源自基于淋巴细胞光散射特征的圈门事件。使用BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞分析仪和FlowJo™软件进行流式细胞术分析和数据分析。
需要注意的是，在上述直方图中，可以观察到MFI损失和背景随光照射增加而增加。这两种变化都会降低染色指数和分辨率。
冠军领奖区
光照射后会导致荧光染料的发射光谱发生变化，这种变化表现为在其他检测器中测量到的溢漏变化。在实验中，这种情况会对研究者产生影响，因为参考对照和样本之间光谱特征的差异会导致补偿或解析误差以及数据伪影。此示例显示了光照射2小时后多个检测器中的溢漏变化，荧光染料中，SBY720受光照影响最大，经光照后的分辨率损失也最为严重。
在此次荧光染料大对决中，RY703获得冠军，因为在这场比赛所测试的染料中，该荧光染料的溢漏变化和MFI损失最小。
*专业提示* 在样本采集期间，请将试管避光保存，以防止光谱特征随时间发生变化。
亚军:
NFY700
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结果将会于10月25日星期五公布
免责声明: 荧光染料大对决中显示的结果和结论均基于在特定条件下进行的实验。用户应根据自己的具体方案对试剂进行评估，因为结果可能因不同的实验条件而异。
碧迪流式细胞仪是Ⅰ类激光产品。仅供研究使用，不可用于诊断或治疗程序。
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