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荧光染料大对决
见证您最常用的荧光染料在竞争中大放异彩!
第6场比赛:单核细胞背景
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经证明(1) 一些花青(Cy™)染料和花青类染料可与单核细胞非特异性结合。还观察到与人Fc受体的其他非特异性结合。非特异性单核细胞结合会增加背景和/或导致假阳性信号,从而降低数据分辨率。
在此次荧光染料大对决中,我们在几个克隆上评估了由黄绿色激光激发且峰值发射波长约为780 nm的染料。
正如预期所示,无论PE-Cy7与何种抗体克隆偶联,均表现出明显的非特异性单核细胞结合。Bio-Rad StarBright™ Yellow 800和BioLegend PE/Fire™ 810也与单核细胞群有不同程度的非特异性结合。

BD Horizon™ RY775 Mouse Anti-Human CD3 UCHT1(货号571376)、BD Horizon™ RY775 Mouse Anti-Human CD8 RPA-T8(货号571380)、BD Horizon™ RY775 Mouse Anti-Human CD19 SJ25C1(货号571374)、BD Pharmingen™ PE-Cy7 Mouse Anti-Human CD3 UCHT1(货号563423)、BD Pharmingen™ PE-Cy7 Mouse Anti-Human CD8 RPA-T8(货号557746)、BD Pharmingen™ PE-Cy7 Mouse Anti-Human CD19 SJ25C1(货号557835)、Bio-Rad StarBright™ Yellow 800 Mouse Anti-Human CD3 UCHT1或BioLegend PE/Fire™ 810 Mouse Anti-Human CD19 SJ25C1试剂对人全血进行染色。用BD Pharm Lyse™ Lysing Buffer(货号555899)裂解红细胞。显示CD3、CD8和CD19与侧向光散射(SSC-A)信号表达的双变量伪色图源自具有存活白细胞前向和侧向光散射特征的圈门事件。使用BD FACSymphony™ A5 SE流式细胞分析仪和FlowJo™软件进行流式细胞术分析和数据分析。N/A表示在我们进行测试时,相应的克隆/特异性无法与该荧光染料偶联。
冠军领奖区
BD Horizon RealYellow™ 775 是唯一没有与单核细胞发生非特异性背景结合的荧光染料,因此我们将其评为本次荧光染料大对决的冠军!
*专业提示* 有几种不同的封闭缓冲液可帮助改善这些非特异性相互作用,如BD Pharmingen™ MonoBlock™ Leukocyte Staining Buffer(货号570002)。
亚军:
SBY800
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结果将会于10月25日星期五公布
免责声明: 荧光染料大对决中显示的结果和结论均基于在特定条件下进行的实验。用户应根据自己的具体方案对试剂进行评估,因为结果可能因不同的实验条件而异。
碧迪流式细胞仪是Ⅰ类激光产品。仅供研究使用,不可用于诊断或治疗程序。
CF是Biotium, Inc.的商标,Cy是Global Life Sciences Solutions Germany GmbH或其附属公司Cytiva的商标。