流式细胞仪标志物指南
宿主免疫分为先天性和适应性免疫应答,1其中骨髓细胞(单核细胞、巨噬细胞、粒细胞和树突状细胞)、自然杀伤(NK)细胞以及先天淋巴细胞代表先天免疫系统,而B淋巴细胞和T淋巴细胞代表适应性免疫系统。1,2
免疫表型分析可利用流式细胞术的独特功能,通过判断多种细胞标志物的有无来同时分析混合的免疫细胞群。3,4
除了细胞群和亚群的表征之外,免疫表型分析还可以鉴定细胞分化的状态并量化与特定细胞功能相关的表面或细胞内分子。3
流式细胞术标志物列表
大多数抗原由人类白细胞分化抗原研讨会给出分化簇(CD)编号,以便采用通用命名法来定义针对特定细胞抗原的单克隆抗体。4例如,CD3是3号分化簇,用于定义所有T细胞上存在的T细胞辅助受体。4
了解更多关于特色抗原和CD标志物的信息。
大多数免疫细胞均有特定的CD标志物,可将这些细胞定义为不同的细胞群。1细胞标志物又称为谱系标志物,用于定义特定的细胞群,以便在每个免疫表型分析实验中进行额外分析。4
除了定义免疫细胞群的谱系标志物外,还使用其他标志物来表征每个细胞群,例如活化标志物(CD69 CD25和CD62L)。4我们的交互式人体细胞图谱列出了经过充分研究的人类免疫细胞类型的谱系和活化标志物。
l骨髓细胞标志物
在进行骨髓细胞群的表型鉴定时,可以使用标志物CD33、CD123、CD14、CD16、HLA-DR、CD11c、CD141和CD1c。5一项研究开发了一种用于量化骨髓细胞、单核细胞和粒细胞的10色流式细胞术方案。6
用于量化所有主要白细胞群的10色流式细胞术方案6 | |
骨髓细胞 | LIN2, CD123, HLA-DR, CD11c, CD11b, CD33, CD16 |
单核细胞1 | CD80, CD143, CD14, CD32, CD64, CD86, CD16, HLA-DR, CD45 |
单核细胞2 | B7H1, TNFR2, CD14, PD-1, CD40, CD16, HLA-DR, CD45 |
粒细胞 | CD66b, CD63, CD14, CD44, CD203c, CCR3, CD16, CD49d, CD15, CD45 |
CD14、CD163和CD68可以检测人类肺部肿瘤中的巨噬细胞,其中CD163是巨噬细胞特异性标志物。7在人类滑液中,CD11c和CD206分别鉴定M1和M2巨噬细胞。8CD38也是人类巨噬细胞反应中能够被持续、强烈诱导的炎症标志物,因此可用于监测炎症疾病状态。9
树突状细胞(DC)分为三种主要亚群:浆细胞样DC(pDC)、髓样/经典DC1(cDC1)和髓样/经典DC2(cDC2)。10CD141和CD1c的原始DC标志物具有局限性,因为两者均在组织和培养物中的cDC和单核细胞衍生细胞上诱导。10
骨髓细胞标志物10 | 功能 |
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CD15 | 粒细胞亚群 |
CD66b | |
CD16 | |
CD45 | |
FCeR1a | |
CD123 | |
Siglec 8 | |
CD14 | 单核细胞亚群 |
HLA-DR | |
CD45 | |
CD16 | |
CD32 | |
CD64 | |
HLA-DR | DC亚群 |
CD123 | |
CD11c | |
CD1c | |
CD141 | |
CD80 | 活化标志物 |
CD86 |
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自然杀伤细胞
常见的自然杀伤(NK)细胞标志物是CD56和CD161。4实验发现外周血中的CD56bright和CD56dim NK细胞显示出激活的效应表型,其性质与中度和重度COVID-19疾病相似。11通过分析Ki-67、HLA-DR(人类白细胞抗原-DR)和CD69的表达来评估NK细胞活化。11
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T细胞标志物
CD4+ T-αβ辅助性细胞亚群包括Th1、Th2、Th9、Th17、Th22和调节性T细胞(Treg),而CD8+ T-αβ细胞亚群包括细胞毒性T淋巴细胞(Tc)1、Tc2、Tc9、Tc17和CD8+ Treg。12
T细胞标志物12 | 功能 |
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CD3 | 谱系标志物 |
CD4 | |
CD8 | |
CD45 | |
CCR4 | T辅助性细胞亚群 |
CCR6 | |
CCR10 | |
CXCR3 | |
CXCR5 | |
CD25 | 调节性T细胞 |
CD127 | |
FoxP3 | |
CD45RA | 成熟 |
CD45RO | |
CCR7 | |
CD27 | |
CD95 | |
CD28 | |
PD-1 | 耗竭 |
CTLA-4 | |
TGIT | |
CD69 | 活化 |
HLA-DR | |
CD107 | 细胞毒性(活化后) |
颗粒酶B | |
穿孔素 |
对于Treg细胞,CD3、CD4、CD25、CD127和Foxp3标志物是定义人体Treg所需的最基本标志物,以实现稳健且准确的设门。13强烈建议将Ki67和CD45RA用于最近活化/增殖的Treg,这两种标志物还可区分初始Treg和TCR触发的Treg。13
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B细胞标志物
B细胞被鉴定为CD19+,可进一步分为过渡型、成熟-初始型、记忆型、非典型记忆型、活化B细胞和浆母细胞;通过流式细胞术进行免疫表型分析可以识别这些亚群。14
B细胞标志物14 | 功能 |
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CD19 | 谱系标志物 |
CD20 | |
CD27 | |
IgD | |
CD38 | B细胞亚群 |
IgM | |
IgG | |
CD24 |
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