BD FACSChorus™ Software

단순화된 워크 플로우로 여러분을 가이드 할 수 있도록 직관적으로 설계된 소프트웨어입니다.

개요

BD FACSChorus ™ Software는 과학적 연구에 집중할 수 있도록 수동 설정 및 모니터링이 필요 없는 간소화된 워크플로우를 사용하여 분류(sorting)를 단순화합니다.

이 소프트웨어는 처리량을 개선하고 가동중지시간을 줄이는 고급 자동화 기술을 이용하여 전체 세포분류 프로세스를 안내하고 실험을 성공적으로 이끕니다.

특징

BD FACSChorus ™ 소프트웨어 설계는 직관적이고 사용하기 쉽기 때문에 초보 사용자도 분류(sorting) 작업에 빠르게 적응할 수 있습니다.

기능:

Laser delay, drop delay, side stream의 자동설정
워크플로우를 안내하는 인터페이스
화면에 표시되는 지침
인덱스 정렬 획득 및 분석
디폴트 plot 및 sort gate
튜브overflow방지
작업자 안전 보호를 위한 deflection plate(필요한 경우에만) 자동켜짐
FCS 3.1 호환성
입증된 BD FACS™ Accudrop 및 BD^® Sweet Spot 기술

응용분야

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Precision sort of cells expressing different levels of GFP

HEK-293 세포를 0.25 μg의 pAcGFP (Clontech) 벡터로 transfection시키고 GFP의 발현에 대해 분석했습니다. 다양한 수준의 GFP를 발현하는 세포는 명확하게 구분 될 수 있습니다. DAPI는 죽은 세포를 배제하기 위해 사용되었습니다. Purity 모드에서 초당 1,000 개 event에서 낮은 수준과 높은 수준의 GFP를 발현하는 세포를 식별하고 분류하기 위해 gate를 그렸습니다. 정렬 후 분석결과 두 집단 모두에서 순도가 99 %를 초과하는 것으로 나타났습니다.

Single-cell deposition

HEK-293 세포를 70 % 에탄올로 고정하고 0.5μg / mL의 DAPI로 염색했습니다.

(A) 집단 계층. SSC, FSC 및 DAPI에 대한 A, H 및 W parameter를 순차적으로 사용하여 doublet 및 세포 응집체를 제외했습니다. 이 실험에 사용된 gating 전략은 유사 분열 수치를 과소 평가하거나 배제했을 가능성이 있습니다.

(B) DNA content 분석. DAPI singlet gate 내의 세포는 2N과 4N 사이의 DNA content를 보여주어> 4N doublet 또는 응집체의 배제를 확인했습니다.

(C) Single-cell 증착 정렬 후 검증. DAPI singlet gate의 세포는 99.7 %의 single-cells증착 효율로 3 개의 96 -multiwell plates로 분류되었습니다. 현미경을 사용하여 well당 하나의 세포가 존재함을 확인했습니다. 하나의 세포를 포함하는well의 대표 이미지를 표시했습니다.

Multicolor panel for purification and immunophenotyping of Treg subsets

건강한 기증자로부터 얻은 말초 혈액 단핵 세포를 분리하고 Treg subset 의 측정 및 정제를 위해 표면 marker cocktail(CD3, CD4, CD25, CD127 및 CD45RA)로 염색했습니다. 림프구 및 singlet은 우선 FSC,SSC 특성을 기반으로 gating 된 다음 CD3 + CD4 + T cell로 gating(표시되지 않음) 했습니다. Tregs 는CD127low/neg CD25high로 식별되었습니다. Treg gate에서 CD45RA + naïve 및 CD45RA– memory Tregs를 식별하고 purity 모드에서 초당 5,000 개 이벤트로 분류했습니다. 정렬 후 분석 결과 memory와 naïve Treg의 동종 집단이 밝혀졌습니다. 이어서 정제된 세포를 면역 표현형을 위한 추가 표면 marker(CD31, CD39 및 CD15)에 대해 염색했습니다. CD31 + recent thymic emigrants (RTEs)은 CD45RA + naive Tregs 내에서 측정된 반면, 고도로 활성화된 Tregs는 CD45RA- memory Tregs 내에서 측정되었습니다.