B細胞研究

B細胞は、抗原刺激の前後で様々な分化ステージを経ます。 成熟・分化するにつれて、各サブセット特有の機能を有し、発揮します。

細胞表面・細胞内マーカの発現の違いや、免疫グロブリンやサイトカイン分泌のプロファイルには特徴があり、これらによって多様な性質や機能への理解を深めることができます。


BDは、B細胞の重要な発生段階の表現型を解析するために、様々な試薬をご用意しています。

例えば、Syndecan-1 (CD138)は、抗体を分泌する形質芽球や形質細胞において発現が見られ、他の機能サブセットとは明瞭にわけることが可能です。


Conventional B細胞の成熟

B細胞は、骨髄において造血幹細胞(HSC)から発生し、遺伝子再構成などが起こる初期分化を経ます。骨髄で負の選択を受けた未熟B細胞は、末梢リンパ組織へと移行し成熟濾胞B細胞へと分化します。1 成熟B細胞におけるB細胞受容体(BCR)複合体は、IgMとIgDの状態で細胞表面に存在し、外来抗原を捕捉し抗原提示を行います。その後、ヘルパーT細胞によって活性化された成熟B細胞は形質細胞へと分化し抗体を産生します。2

異なる機能を担うB細胞サブセット

B細胞の中には、conventional B細胞と異なる分化系統をたどるサブセットが存在し、異なる機能と抗原発現パターンを示します。例えば、辺縁帯(MZ) B細胞は、自然免疫様細胞としてT細胞非依存性の抗体産生を行います。Conventional B細胞とは、異なり BCRではなくToll様受容体(TLR)の結合を介し活性化します。また、CD1dとCD21の発現が見られ、CD23は発現しないといった発現パターンを示すことが観察されています。1,2 さらには、抑制に働く機能をもつB細胞が近年同定されていますが、IL-10やTGF-β-1といったサイトカインを分泌することが知られています。1–4

B細胞成熟の解析

7種の細胞表面マーカーを用いて、マウス骨髄B細胞の各分化ステージの表現型解析することができます。

BP1とCD24の発現の違いにより、弱陽性CD45R/B220集団内で、pre-pro-B、pro-B、およびpre-B細胞を展開します。さらに、未熟、移行期、初期および後期成熟B細胞を、IgMおよびIgDの発現の違いに基づいて区別します。IL-7受容体であるCD127の発現を、各サブセットで解析し、B細胞が成熟するに従って減少することを示しました。

B細胞の重要な発生段階と主要マーカー
B細胞の重要な発生段階と主要マーカー

細胞野環境や分化状態、その他の因子によりマーカーは変化する可能性があります。

マウス骨髄におけるB細胞発生段階解析
マウス骨髄におけるB細胞発生段階解析

C57BL/6 マウス骨髄細胞は、抗IgM FITC, CD43 APC, BP-1 PE, CD127 PE-Cy™7, CD45R/B220 APC-Cy7, CD24 BV421, IgD BV510で染色し、BD FACSCanto™ II フローサイトメーターで測定をした。


References

1. Allman D, Pillai S. Peripheral B cell subsets. Curr Opin Immunol. 2008;20:149-157.

2. Shapiro-Shelef M, Calame K. Regulation of plasma-cell development. Nature Rev Immunol. 2005;5:230-242.

3. Lund FE. Cytokine-producing B lymphocytes–key regulators of immunity. Curr Opin Immunol. 2008;20:332-338.

4. Mauri C, Bosma A. Immune regulatory function of B cells. Annu Rev Immunol. 2012;30:221-241.



APC-Cy7: US Patent 5,714,386

Cy™ is a trademark of GE Healthcare. Cy™ dyes are subject to proprietary rights of GE Healthcare and Carnegie Mellon University, and are made and sold under license from GE Healthcare only for research and in vitro diagnostic use. Any other use requires a commercial sublicense from GE Healthcare, 800 Centennial Avenue, Piscataway, NJ 08855-1327, USA.